復(fù)旦大學(xué)附屬上海市公共衛(wèi)生臨床中心科研人員張小楠博士、陸偉醫(yī)師，在袁正宏研究員和張占卿教授指導(dǎo)下，經(jīng)4年多努力，成功建立了一種能夠通過顯微鏡，直接在組織切片上觀察患者肝組織內(nèi)乙肝病毒儲(chǔ)存庫（cccDNA）情況以及其在患者肝細(xì)胞中分布情況的方法。該研究對揭示慢乙肝長期遷延不愈根本原因、監(jiān)測慢乙肝患者抗病毒治療后cccDNA清除情況以及針對患者不同病情如何設(shè)計(jì)清除乙肝病毒cccDNA新策略等具有重要意義。國際著名醫(yī)學(xué)期刊《臨床研究雜志》近日在線發(fā)表了這一成果論文，并將該成果作為“亮點(diǎn)論文”重點(diǎn)推薦，邀請國際著名乙肝專家作專題評論。 

　　cccDNA是乙肝病毒在患者肝組織內(nèi)的遺傳物質(zhì)儲(chǔ)存庫，它儲(chǔ)存著包含病毒復(fù)制、組裝所需的所有遺傳信息。大量臨床與基礎(chǔ)研究表明，慢乙肝長期不愈的根本原因就是cccDNA在肝內(nèi)的長期存在，以及隨之造成的病毒表面抗原長期陽性。但cccDNA在慢乙肝患者肝臟中水平極低，傳統(tǒng)分子生物學(xué)方法不僅檢測困難，而且無法顯示其在肝組織內(nèi)的分布特點(diǎn)。 

　　張小楠研究組應(yīng)用創(chuàng)新方法，成功觀察到肝組織內(nèi)cccDNA在患者肝細(xì)胞中分布情況后，將該技術(shù)與乙肝病毒主要抗原的免疫組織化學(xué)染色結(jié)合，終于獲得了病毒核酸與蛋白質(zhì)的綜合圖像。研究證實(shí)，經(jīng)過一年以上抗病毒治療的患者，肝細(xì)胞內(nèi)仍存在病毒的cccDNA。經(jīng)大量樣本的分析、歸納，研究組提出在單細(xì)胞水平乙肝病毒存在抗原富集期、DNA富集期和潛伏期三階段假說，并由此推測患者體內(nèi)肝細(xì)胞生理水平和病毒復(fù)制活躍度的變化可以導(dǎo)致這三個(gè)階段的相互轉(zhuǎn)換。 

　　該假說豐富了學(xué)術(shù)界對乙肝病毒肝內(nèi)生活史的認(rèn)識(shí)，并為進(jìn)一步針對患者不同病情設(shè)計(jì)清除乙肝病毒cccDNA的新策略提供了理論基礎(chǔ)。該技術(shù)具有廣闊的應(yīng)用前景，由于可用來監(jiān)測慢乙肝患者抗病毒治療后cccDNA的清除情況，故為評價(jià)抗病毒藥物清除病毒的潛力提供了重要的技術(shù)平臺(tái)，并可為臨床醫(yī)生制訂更好的治療方案，甚至指導(dǎo)開發(fā)新藥物提供幫助。